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Cupri-SK-091202

  • Stamm: DSM 428, bezogen vom Centraalbureau voor Schimmelcultures, Netherlands (www.cbs.knaw.nl)
  • Medium: modified M81, Basismedium (BM)
  • Kultivierung: Schuettelschrank im 27C Raum, 175rpm
  • Glucosekonzentrationen: 0.2% (2g/L) und 2.0% (20g/L)

Zusammensetzung

BM (1.2) GLC AMC VK H2O fl. Vol Vol SK
0.2% 41.5ml 0.5ml 0.2ml (=0.4g/L) 1.5 ml 6.3ml 50ml 250ml
2.0% 41.5ml 5.0ml 2.0ml (=4.0g/L) 1.5 ml 0.0ml 50ml 250ml
  • VK: Vorkultur aus Experiment Cupri-SK-091123
  • BM (1.2): Basismedium M81, 1.2fach konzentriert, siehe Laborbucheintrag vom 01.12.09
  • GLC: Glucose Loesung, 200g/L, von Ruxandra hergestellt
  • AMC: NH4Cl Loesung, 100g/L, siehe Laborbucheintrag vom 01.12.09
  • Konzentration von AMC wurde so gewaehlt, dass auf 1g GLC circa 0.2g AMC fallen –> max. Bio, keine PHB Bildung

Messdaten

0.2% Glucose 2.0% Glucose
Date & Time Hours OD 600 pH AMC OD 600 pH AMC
02.12.2009 15:00 00.00 00.286 00.272
02.12.2009 17:45 02.75 00.284 00.324
03.12.2009 09:20 18.33 00.350 00.870
03.12.2009 15:15 24.25 00.365 6.74 01.140 6.46
03.12.2009 17:30 26.50 00.460 01.750
04.12.2009 09:50 42.83 00.685 05.740
04.12.2009 13:30 46.50 00.626 0.40 g/L1 06.540 3.37 g/L1
04.12.2009 22:05 55.08 00.840 06.730
07.12.2009 09:30 114.50 02.780 07.560
07.12.2009 16:30 121.50 02.670
08.12.2009 09:50 138.83 02.610

1Standardkurve von Christiane benutzt und auf NH4Cl umgerechnet.

Bemerkungen

Wachstum der 20g/L Kultur (blaue Linie) zeigt lineares Wachstum (statt exponentielles). Daraus kann man schliessen, dass keine Biomasse entsteht, sondern nur PHB synthetisiert wird. Wie die AMC Messung jedoch zeigt, ist noch genuegend AMC im Medium vorhanden, sodass ein exponentielles Biomassewachstum zu beobachten sein sollte. Andererseits zeigt der Wert der Messung, dass nach 46.5h noch 3.37g/L von urspruenglich 4.0g/L im Medium vorhanden sind, d.h. erst 0.63g/L verbraucht wurden. Da das aufgenommene AMC mit der Non-PHB Biomasse linear korreliert ist, kann demzufolge auch noch nicht viel Non-PHB Biomasse entstanden sein. Der lineare Anstieg der OD600 ist also wahrscheinlich auf reine PHB Synthese zurueckzufuehren. Demzufolge muss eine andere Ursache fuer die Inhibierung des Wachstumes vorliegen.